舜宇SOPTOP ICX41 倒置荧光显微镜使用操作规程

一、仪器概述

（一）基本信息

1.设备名称：倒置荧光显微镜

2.设备型号：ICX41

3.生产厂家：舜宇SOPTOP

4.核心用途：适用于生物医学、生命科学等领域，可对细胞、组织切片、微生物等样本进行明场观察和荧光成像，支持多种荧光染料标记样本的观察分析

5.关键特性：采用倒置式结构设计，便于观察培养皿、培养瓶中的活体样本；配备高数值孔径物镜，荧光激发效率高、成像清晰；具备多种荧光激发波段，支持明场、荧光等多种观察模式切换；搭载高分辨率成像系统，可实现图像采集、存储与分析

（二）人员资质要求

1.操作人员需经过专业培训，熟悉仪器结构、原理及操作流程，掌握荧光显微镜使用的基本常识

2.首次操作前必须仔细阅读本操作规程及仪器原厂使用说明书，无资质人员禁止擅自操作

（三）安全注意事项

1.仪器需放置在平稳、干燥、无振动、远离强磁场和热源的环境中，避免阳光直射

2.操作时需佩戴一次性手套，避免手指接触物镜、样品台、荧光滤块等关键部件，防止污染

3.荧光光源具有一定强度，避免直视激发光，防止损伤眼睛；光源开启后禁止频繁开关，关闭后需等待冷却再断电

4.禁止擅自拆卸、改装仪器部件，维修需由舜宇授权工程师进行

5.使用过程中若出现异常发热、异响、异味等情况，立即关闭电源并联系技术支持

二、操作前准备

（一）环境与设备检查

1.环境要求：室温控制在18-25℃，相对湿度40%-60%，工作台稳固无晃动，周围无灰尘、腐蚀性气体及强电磁干扰

2.外观检查：查看仪器外壳、物镜、目镜、样品台、光源等部件无破损、污渍、松动，电缆连接牢固无破损

3.配件检查：确认物镜、目镜、荧光滤块组、样品夹具、电源线、数据线等配件齐全且完好

4.电源检查：确认供电电压稳定，符合仪器额定电压要求（参照原厂说明书），接地可靠

（二）耗材与样本准备

1.样本要求：制备符合观察标准的样本，荧光标记样本需新鲜制备或妥善保存，避免荧光淬灭

2.耗材准备：根据样本类型准备合适的培养皿、载玻片、盖玻片等，确保耗材干净无划痕、无荧光背景

三、操作流程

（一）开机流程

1.连接电源：将电源线插入仪器电源接口，另一端连接接地的电源插座

2.开启主机：打开仪器侧面或背部的主电源开关，仪器进入初始化状态，指示灯亮起

3.启动光源：

1.明场观察：打开透射光光源开关，调节光源亮度旋钮至合适强度（初始建议调至中等亮度）

2.荧光观察：打开荧光光源开关（汞灯或LED光源），等待光源稳定（汞灯需预热5-10分钟，LED光源无需长时间预热）

4.启动成像系统：打开电脑及图像采集软件，建立软件与显微镜的连接（确认数据线连接正常）

（二）观察模式设置

1.明场观察设置：

1.旋转物镜转换器，选择合适放大倍数的物镜（建议从低倍镜开始，如10×）

2.调节聚光镜高度，使光线均匀照射样品台

3.打开透射光阑，根据物镜倍数调整光阑大小（低倍镜光阑调大，高倍镜适当调小）

2.荧光观察设置：

1.根据样本标记的荧光染料类型，旋转荧光滤块转轮，选择对应的激发/发射滤块组（如FITC、DAPI、TRITC等）

2.调节荧光光源强度，避免强度过高导致荧光淬灭或样本损伤（初始从低强度开始）

（三）样本放置与定位

1.将制备好的样本（培养皿、载玻片等）平稳放置在样品台上，用样品夹具轻轻固定，确保样本覆盖观察区域

2.通过样品台调节旋钮（X/Y轴），将待观察区域移动至物镜正下方

（四）聚焦与观察

1.低倍镜聚焦：

1.旋转粗调焦旋钮，使样品台缓慢上升，直至通过目镜能看到模糊的样品轮廓

2.切换至细调焦旋钮，缓慢调节至图像清晰

3.调节目镜瞳距，使双眼观察视野重合，根据个人视力调节目镜屈光度补偿

2.高倍镜观察：

1.确认低倍镜下找到目标区域并聚焦清晰后，旋转物镜转换器切换至更高倍物镜（如20×、40×、60×）

2.通过细调焦旋钮微调，使图像达到最佳清晰度（高倍镜下禁止使用粗调焦旋钮快速调节，防止物镜与样本碰撞）

3.模式切换：根据观察需求，可在明场与荧光模式间切换，切换时需重新调节亮度和聚焦

（五）图像采集与存储

1.在图像采集软件中，设置图像分辨率、曝光时间、增益等参数（荧光图像曝光时间不宜过长，避免背景噪声过大）

2.预览图像效果，微调焦距、光源强度、滤块组等参数，直至图像质量满意

3.点击软件中的“采集”按钮，获取图像，可进行裁剪、调整对比度等简单编辑

4.按实验要求将图像以指定格式（如JPG、TIFF）保存至电脑指定文件夹，命名规范清晰（包含样本名称、观察日期、放大倍数、观察模式等信息）

（六）关机流程

1.关闭图像采集软件，退出程序

2.关闭荧光光源：若为汞灯，先关闭光源开关，等待15-20分钟冷却后再关闭主电源；若为LED光源，可直接关闭光源开关

3.关闭透射光光源，将光源亮度旋钮调至最低

4.旋转物镜转换器，使低倍镜对准样品台中央位置，降低样品台至最低处

5.取下样品，清理样品台及夹具，用干净的镜头纸轻轻擦拭物镜和目镜表面的灰尘

6.关闭仪器主电源开关，拔掉电源线

7.整理配件，填写仪器使用记录，包括使用日期、操作人员、使用情况、是否存在异常等

四、清洁与维护

（一）日常清洁

1.表面清洁：用干净的软布蘸取少量中性清洁剂（如75%酒精），轻轻擦拭仪器外壳、样品台、夹具等表面，去除污渍和灰尘，然后用干布擦干

2.光学部件清洁：

1.目镜、物镜表面：用专用镜头纸轻轻擦拭，若有顽固污渍，可蘸取少量镜头清洁液（避免直接滴在镜头上）

2.荧光滤块：用干燥的镜头纸轻轻擦拭表面灰尘，禁止触碰滤光片镀膜

3.清洁后确保仪器各部件干燥，无残留清洁剂

（二）定期维护

1.每日使用后：清理样品台，检查物镜、目镜是否清洁，关闭电源并盖好防尘罩

2.每周维护：检查仪器电缆连接是否牢固，清理仪器周围灰尘，检查荧光滤块组是否松动

3.每月维护：检查物镜、目镜是否有划痕或霉变，若有问题及时更换；校准样品台移动精度；检查光源亮度是否稳定

4.年度维护：联系舜宇授权工程师进行全面保养，包括光源校准、光学系统清洁、机械部件润滑、成像系统调试等