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Autopure 蛋白纯化仪

发布时间: 2026年03月18日 作者: 来源: 点击:

Autopure 蛋白纯化仪标准操作规程

目的:规范Autopure系列蛋白纯化仪的使用和维护。

范围:本规程适用于Autopure 系列蛋白纯化系统及工作站的使用和维护。

职责:仪器分析员对本规程的实施负责

操作环境:

电压:220V±10% 频率:50~60HZ 温度:20~30℃; 相对湿度<80%;

远离高电磁干扰、高振动设备,有良好的通风设施,避免空调直吹。

准备:

准备所需的buffer液和洗脱液(HPLC级),用合适的滤膜(推荐0.45um及以上)过滤,超声脱气20min。

根据待检样品的需要更换合适的层析柱(注意方向)。

配制样品和标准溶液。

如果采用缓冲盐做洗脱液,必须连接背冲洗管路进行密封圈冲洗。

检查仪器各部件的电源线、数据线和输液管道是否连接正常。

开机及仪器联机:依次开启蛋白纯化仪主机和组分收集器电源,打开电脑电源。蛋白纯化仪主机及组分收集器开通电源后将自动进行自检,待自检结束后(约2分钟),运行CDSystem工作站软件,执行软件与仪器联机。

更换buffer液,排气泡:将对应的沉子坠头放入装有少量新buffer液的烧杯中

逆时针转动泵的排空阀旋钮180°,打开排空阀,使用注射器在排液阀出口慢速抽取20ml;

将顺时针拧紧排空阀,将沉子坠头放入装有准备好的buffer液溶剂瓶中,点击CDSystem工作站,手动控制界面的systemwash,置换系统管路中的buffer液;

如配备的为二元梯度泵,则按上述步骤依次更换各路的buffer液和洗脱液。

注意:请在处理buffer液和洗脱液时尽量避免将滴洒到仪器表面,以免仪器塑料零部件被腐蚀。

添加&更换背冲洗液:往盛放背冲洗液的离心管中装入25ML左右的20%乙醇水溶液,仪器会在运行泵时自动冲洗柱塞杆。

注意:

背冲洗液视情况定期更换,使用时间不得超过一周。

在使用含盐buffer液作为缓冲液时,必须保证背冲洗管路中含清洗液。

设置手动运行或方法运行

手动运行:根据纯化试验的需求设定泵流速、梯度、系统压力报警上限、进样阀及柱位阀流路、检测器波长、组分收集器收集方式等参数,待系统平衡后,进行进样,冲洗、洗脱等步骤

方法运行:选取需要运行当前样品的方法(如无运行该样品的方法则参照CDSystem操作手册进行新建),并输入相关样品信息及选择数据文件名称格式,运行方法,系统根据设定方法自动运行:平衡、进样、柱冲洗、洗脱、收集、层析柱再生。

注意:

如使用定量环进样,请使用buffer液填充定量环,避免定量环中存在气泡被带入到层析柱中而损坏层析柱。

如使用定量环进样方式,请在进样阶段使用大于定量环体积的buffer液通过定量环,最大限度的减小样品残留在定量环中的可能性。

如使用固定体积泵直接上样方式,上样体积设置需加上泵头管路体积。

请在处理样品时尽量避免将滴洒到仪器表面,以免仪器塑料零部件被腐蚀。

如在无人值守情况下运行,请检查buffer液和洗脱液是否足够,以免管路走空造成实验数据错误及因走空导致的柱塞杆和密封圈磨损。

如系统含有背压阀,压力报警上限设置需加上背压阀所备压力值。

数据处理及生成报告

在CDSystem工作站中的数据处理界面中,可对运行生成的数据文件进行手动或自动积分处理,并可以对不同数据文件中的曲线进行加、减、除、求导、比较等处理

在CDSystem工作站中的报告(报表)界面,可以设计报告模板以及对已积分处理的数据文件进行报告输出等操作

系统清洗及关机

取下层析柱,使用20%的乙醇水溶液清洗置换出系统系统中的缓冲溶液,置换时可切换各阀不同通道,使仪器各部件、各管路均保存在清洗溶液中。

结束系统运行使泵流速降至0ml/min,断开工作站与软件联机,关闭CDSystem工作站,关闭仪器电源,关闭电脑。

填写使用记录

提示:离开实验室前,请再次检查实验室安全,未在使用中的仪器及设备电源是否关闭。节能减排,为保护地球生态贡献自己的一份力。

仪器日常维护与保养

每个月在5%稀硝酸溶液中超声清洗沉子坠头,保持坠头畅通无阻。

每三个月检查一次紫外灯能量。

每年定期更换密封圈。

长期不使用仪器时,每月定期开机,使用乙醇冲洗系统。